流式细胞仪凭仗其高通量、多参数的优势，已成为生命科学研究的中心仪器之一。受美国禁令影响，流式细胞仪的国产代替进程进一步提速！本文为我们详细剖析了流式细胞仪的结构原理、运用场景及遍及的问题的解决计划。

  流式细胞术（Flow Cytometry, FCM）是一种根据流式细胞仪的高效剖析技能，可对细胞或微粒的理化特性进行多参数定量检测及分选。凭仗其快速、精准和多功用的优势，该技能已大范围的运用于根底科研、临床确诊和药物开发等范畴。

  •淋巴细胞亚群检测：经过CD3、CD4、CD8等标志物区别T细胞亚群（如Th1、Th17、调理性T细胞），评价免疫功用状况。

  •白血病免疫分型：结合CD34、CD45等标志物，清晰白血病细胞来源及分解阶段，辅佐确诊与医治。

  •细胞周期：运用PI等DNA结合染料，量化G0/G1、S、G2/M期细胞份额，评价肿瘤细胞增殖状况。

  •凋亡检测：Annexin V结合磷脂酰丝氨酸外翻，合作PI区别前期凋亡与晚期凋亡细胞。

  •细胞因子排泄剖析：运用布雷菲德菌素A阻断排泄途径，检测胞内IL-4、IFN-γ等因子表达。

  •HLA-B27检测：作为强直性脊柱炎的重要标志物，流式检测HLA-B27具有高灵敏度和特异性。

  •肿瘤微环境剖析：经过CD163、CD206等标志物区别M1/M2型巨噬细胞，评价肿瘤免疫状况。

  •圈门战略：根据FSC/SSC开始圈定方针细胞群，结合荧光信号进一步细分亚群。

  •降维算法：t-SNE或FlowSOM可辅佐可视化多参数数据，提醒躲藏细胞集体。

  •计划：滴定抗体浓度，选用直接染色法（一抗+荧光二抗），验证固定液（胞浆蛋白用皂素，白用Triton X-100）。

  流式细胞仪凭仗其高通量、多参数的优势，已成为生命科学研究的中心仪器之一。试验成功的重点是谨慎的流程规划、合理的抗体配色及精准的数据剖析。跟着新式荧光染料（如ABflo®系列）和自动化分选技能的开展，流式细胞仪将在单细胞组学、免疫医治及精准医疗中发挥更重要的效果。