在细胞生物学的探究旅程中,咱们经常面对一个中心问题:怎么精确地衡量细胞的生机?这不只关系到试验数据的精确性,更直接影响到研讨定论的可靠性。细胞计数仪,作为现代生物试验室的得力助手,其活率剖析功用的精确性天然成为了科研人员重视的焦点。
今日,咱们就来聚集一个中心议题——细胞计数仪在台盼蓝形式下的活率计数精确性。台盼蓝染色法,经过这种染色办法,咱们我们可以调查到活细胞的胞膜可以排挤台盼蓝,坚持原色;而死细胞因为胞膜的完整性受损,通透性添加,导致台盼蓝进入细胞内部,将其染成蓝色。因而可以明晰地区别活细胞与死细胞。可是,当这项技能与现代细胞计数仪结合时,其成果能否经得起科学的查验?
经过装备数个已知活率(理论活率)的HEK293细胞样品,对其进行台盼蓝染色,并运用细胞计数仪丈量活率,验证细胞计数仪细胞活率剖析的精确性。
1、将HEK293细胞复苏后,运用PBS对细胞进行重悬,细胞状况杰出,在显微镜下调查细胞,其活率约为99%;
2、水浴加热灭活部分细胞,经过将活细胞与死细胞按份额混合,别离得到理论活率为90%的Cell1、70%的Cell2、45%的Cell3;
3. 运用牛顿光学Venus全自动高通量细胞计数仪对三种不同活率的样品别离剖析三次,取平均值。
牛顿光学细胞计数仪在高、中高、中活率的计数成果和理论值成果附近,牛顿光学细胞计数仪的台盼蓝活率计数成果精确。